线粒体膜电位检测

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技术原理


JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。



实验方法


Step1:细胞培养

Step2:转染或药物处理

Step3:细胞收集

Step4:加 JC-1 试剂

Step5:上机检测


案例展示


线粒体膜电位检测(图1)

流式检测线粒体膜电位

实验周期及交付标准


1. 实验周期:2-3周

2. 交付标准:流式检测图、比值、原始数据、实验报告(实验步骤、试剂、仪器)


需确认的信息


1. 样本的种属及类型(组织还是细胞)

2. 样本数量

3. 是否提供探针

4. 拍照要求、分析要求



线粒体膜电位检测(图5)